Главная
->
Медицина
->
Морфологические изменения в пульпе при моделировании хронического пульпита.
Морфологические изменения в пульпе при моделировании хронического пульпита.
Кафедра патологической анатомии, кафедра терапевтической стоматологии, кафедра биологии ВолГМУ, лаборатория морфологии и иммуногистохимии ВНЦ РАМН и АВО.
The chair of pathological anatomy, the chair of therapeutic dentistry, the chair of biology, the laboratory of morphology and immunohistochemistry VNC RAMN and ABO.
Проблема пульпита на протяжении многих лет привлекает внимание исследователей. Еe актуальность объясняется тем, что пульпит, занимает в структуре стоматологических заболеваний значительное место: 20-30% от общего числа лиц, обратившихся за стоматологической помощью[1], а успех эндодонтического лечения в нашей стране составляет 36% [4].
Считается, что основной причиной, способствующей воспалению в пульпе, является кариозное поражение, которое проявляется локальным, прогрессивным разрушением зуба [1,14]. Начальные стадии воспалительного процесса в пульпе зуба в основном протекают по типу экссудативного воспаления, однако исход этого процесса может существенно отличаться ввиду ограниченности полости зуба твердыми дентинными стенками, почти полным отсутствием коллатерального кровообращения и способностью одонтобластов к выработке репаративного дентина [1,3,7,10].
На сегодняшний день не существует четких временных границ между острым и хроническим воспалением в пульпе зубов [9]. Для подготовки ответа иммунной системы необходимо от 7 до 14 суток, за это время происходит клонирование лимфоцитов и их дифференцировка в эффекторные клетки [10]. При остром воспалении нейтрофилы выделяют вещества, разрушающие ткани, включающие в себя кислородные радикалы, лизосомальные ферменты и значительные количество оксида азота (NO) [8,10,11,12]. Эти агенты способствуют деградации пульпарной ткани и активации иммунологической реакции [7]. После активации факторов неспецифической резистентности Т-хелперы, цитотоксические лимфоциты, макрофаги и специфические антитела-продуцирующие плазматические клетки помогают факторам неспецифической резистентности справиться с инфекционным агентом [9]. Не смотря на воздействие микроорганизмов и интенсивную воспалительную реакцию, пульпа может сохранять свои функции еще продолжительный период времени, но в отсутствие правильно проведенного лечения результатом обычно оказывается пульпарный некроз [1,4,7] .
Гистологическое строение пульпо-дентинного комплекса.
D - дентин, PD - предентин, OB - одонтобласты, CF (cell free zone)
- бесклеточная зона, CR (cell rich zone) - зона богатая клетками [9].
В зависимости от вирулентности инфекционного начала, компенсаторно-приспособительных возможностей организма, общего иммунного статуса острое воспаление пульпы может перейти в хроническое, но нередко пульпит может возникнуть как первично-хронический воспалительный процесс [1,2,4].
Хроническое воспаление может развиться и без предшествующего острого воспаления, как реакция на внедрение бактериальных антигенов при кариозном процессе и микроподтекании между реставрацией и зубными тканями. Хроническое воспаление иногда рассматривается как «неудавшееся восстановление» («frustrated repair») после острого воспаления [9].
Схема кровоснабжения пульпы.
Pl - сплетение Рашкова [9].
При патологоанатомическом исследовании основным изменением при хроническом пульпите является разрастание волокнистой соединительной ткани. Клеточная реакция при хроническом пульпите проявляется лимфо-гистиоцитарной инфильтрацией. В корневой пульпе часто встречаются явления фиброза и петрификации. Кроме того, выявляется вакуолизация цитоплазмы одонтобластов, гиалиноз коллагеновых волокон, следы кровоизлияний различной давности [1,2,4].
Цель работы.
Выявить морфологические особенности протекания воспалительного процесса в пульпе зуба в различные сроки экспериментально моделируемого хронического пульпита.
Методика исследования.
Исследования были выполнены на 15 половозрелых нелинейных белых крысах-самцах массой 350-420 г. Зубы животных интактной группы (5 крыс, n = 20) составляли контроль. Животные содержались в условиях вивария, согласно правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ Р 50258-92, ГОСТ 3 51000.3-96 и 51000.4-96) с соблюдением Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997).
У животных экспериментальной группы (10 крыс, 40 зубов) моделировали хронический пульпит. Под общей анестезией раствором золетила 5 мг/кг и рометара 2% 2 мг/кг [5] алмазным шаровидным бором с диаметром рабочей части 1,5 мм наносили повреждения на жевательной поверхности 4 моляров. Повреждения были сделаны на глубину 1,5 мм и точечно файлом № 20 вскрыта полость пульпы. Крысы контрольной группы были только анестезированы аналогично опытной группе. Все животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище.
Через 2 недели (1-я группа) , 4 недели (2-я группа), 6 недель (3-я группа), 8 недель (4-я группа), 10 недель (5-я группа) крысы подвергались эвтаназии путем декапитации в соответствии с Приложением № 4 к Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных (Приказ № 755 от 12.08.1977 г.). Зубы фиксировали в течение 24 часов в 10% растворе нейтрального забуференного формалина (pH 7,4), декальцинировали в растворе трилона В, обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой гистологической методике. На роторном микротоме изготавливались срезы толщиной 3-5 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином по стандартной методике [6].
Гистологические препараты изучали с использованием микроскопа «Micros» (Австрия), фотографировали цифровой камерой (Canon, Япония). При исследовании оценивали наличие морфологических признаков воспалительной реакции в пульпе зуба.
Гистологическое строение пульпо-дентинного
комплекса у контрольных животных.
D - дентин, PD - предентин, OB - одонтобласты, CF (cell free zone)
- бесклеточная зона, CR (cell rich zone) - зона богатая клетками,
Pl - сплетение Рашкова. Окраска гемотоксилин-эозин, объектив Х 40.
Результаты исследования и их обсуждение.
В пульпе зубов контрольной группы выявлено нормальное гистологическое строение.
В пульпе зубов первой экспериментальной группы отмечались умеренно выраженные явления отека стромы, полнокровие кровеносных сосудов и очаговые кровоизлияния в строму, а так же умеренное очаговое разрастание волокнистой соединительной ткани, отложение солей кальция и диффузная инфильтрация стромы с незначительным количеством лимфоцитов и макрофагов.
При морфологическом исследовании второй группы были выявлен незначительный неравномерный отек стромы, умеренное полнокровие кровеносных сосудов, а так же умеренное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани. В единичных случаях отмечалась выраженная очаговая инфильтрация стромы сегментоядерными нейтрофильными гранулоцитами (формирование пульпарных микроабсцессов).
Хроническое воспаление пульпы: нейтрофильная инфильтрация,
полнокровие кровеносных сосудов, разрастание соединительной ткани.
Окраска гемотоксилин - эозин, объектив Х 88 [9].
В третьей экспериментальной группе отмечалось умеренное полнокровие кровеносных сосудов и умеренное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани. Наряду с этим наблюдалась очаговая инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами. Необходимо отметить очаговые дистрофические изменения (кальцификация) в пульпе на фоне умеренно выраженных признаков диффузного продуктивного (хронического) пульпита.
В пульпе зубов четвертой и пятой экспериментальных групп отмечалось отложение солей кальция, более выраженное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани и очаговая инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами, что свидетельствует о сохранении дистрофических изменений в пульпе и умеренно выраженных признаках продуктивного воспаления (хронического пульпита).
Экспериментально полученный хронический пульпит.
Участок пульпы с лимфоидной инфильтрацией и полнокровием
кровеносных сосудов. Окраска гемотоксилин - эозин, объектив Х 40.
Полученные данные сопоставимы с описанием морфологической картины пульпита в научной литературе[1,2,3,4,7,8,9,13,14], что говорит об адекватности, предложенной модели хронического пульпита. Исследование морфологических изменений в пульпе зуба выявило ряд особенностей протекания воспалительного процесса в пульпе зубов крыс.
Экспериментально полученный хронический пульпит.
Участок пульпы с выраженным интерстициальным отеком.
Окраска гемотоксилин - эозин, объектив Х 40.
Заключение.
Результаты исследования свидетельствуют о том, что в пульпе зубов второй и третьей экспериментальных групп (2 и 4 неделя эксперимента) обнаруживаются морфологические признаки экссудативного серозного, реже гнойного очагового воспаления и умеренно выраженные признаки продуктивного (хронического) пульпита. В более поздние сроки эксперимента (6-10 недель) отмечено преобладание признаков продуктивного воспаления в пульпе и очаговое дистрофическое обызвествление.
Литература.
1. Боровский Е.В. // Терапевтическая стоматология. – М.: «Медицинское информационное агенство». - 2004. - С. 375-377
2. Данилевский Н.Ф., Сидельникова Л.Ф., Рахний Ж.И. // Пульпит. - Киев.: Издательство «Здоровье». - 2003. – С. 18-24
3. Коэн С., Бернс Р.// Эндодонтия. - Перевод с английского Шульги О.А., Куадже А.Б.. –С.-Петербург: НПО «Мир и семья», ООО «Интерлайн». - 2000.- С. 312-320
4. Петрикас А.Ж. // Пульпэктомия. – 2-е изд. – М.: АльфаПресс. 2006. - Стр. 26-28, 35
5. Пламб Д.К.// Фармокологические препараты в ветеринарной медицине. - Перевод с англ. Осипова Е.И.- М.: Аквариум ЛТД. - 2002. - Стр. 737-739, 774-776
6. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. // Микроскопическая техника. - М.: Медицина. - 1996. – 544с.
7. Bergenholtz G., Horsted-Bindslev P., Reit C.// Textbook of endontology. - Blackwell Publishing Ltd. - 2010. - P. 25-278.
8. Cawson R.A., Odell E.W. // Oral Pathology. - Churchill Livingstone. - 1995.- Р. 7-9
9. Hargreaves K.M., Goodis H.E. // Seltzer and Bender’s dental pulp. - Quintessence Puplishing Co, Inc. 2002. - P. 227-235
10. Ingle J.I., Bakland L.K. // Endodontics. – William & Wilkians. - 1994. – Р. 350-357
11. Kamal A.M., Okiji T., Kawashima N., Suda H./ Defence response of dentine/pulp complex to experimentally induced caries in rat molars: an immumohistochemical study on kinetics of dental Ia antigen-expressing cells and macriphages. / J. Endod. 23. – 1997. - P.115-120.
12. Kawashima N., Nakano-Kawanishi H., Suzuki N., Takagi N., Suda H. // Effect of NOS Ingibitor on Cytokine and COX2 Expression in Rat Pulpitis. - J. Dent. Res. 84. - 2005. - P. 762
13. Nevill B. W., Allen C. M., Bouquot J.E. // Oral and Maxillofacial Pathology. – 2002. - Р. 107-110
14. Seltzer S., Bender I. // The dental pulp. – Philadelphia. - J.B. Lippincott Company. - 1987. - P. 11, 252-260
Аннотация.
При изучении морфологических изменений в пульпе крыс при моделировании хронического пульпита на 2 и 4 неделе эксперимента обнаружены морфологические признаки экссудативного серозного, реже гнойного очагового воспаления и умеренно выраженные признаки хронического пульпита. В более поздние сроки эксперимента (6-10 недель) отмечено преобладание признаков продуктивного хронического воспаления в пульпе и очаговое дистрофическое обызвествление.
Ключевые слова: хронический пульпит, моделирование, воспаление, крыса.
Abstract.
Morphological alterations in rat pulps were studied in experimental model of chronic pulpitis. They resulted in the evidences of exudative serous, seldom suppurative local inflammation and moderate evidences of chronic pulpitis on 2-4 weeks of the experiment. There was a prevalence of evidences of plastic chronic inflammation and local dystrophic calcification on 6-10 weeks.
Key words: chronic pulpitis, experimental model, inflammation, rat.
- Нравится