г.Волгоград. Волгоградский государственный медицинский университет
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
Кафедра ортопедической стоматологии
Заселение открытых биотопов тела новорожденного происходит с началом естественного вскармливания. Наличие в грудном молоке микроорганизмов, создает предпосылки для контаминации слизистых оболочек ротовой полости младенцев условно-патогенной флорой [1].
Бактериолактия – выделение микроорганизмом с грудным молоком, несомненно, влияет на формирование биоценоза полости рта, так как данная микроэкосистема относится к открытым и постоянно обновляемым [2, 3].
С этих позиций представлялось интересным проследить становление микробиоценоза новорожденных, выявит эпидемиологическую значимость бактериолактии, что и предопределило цель настоящего исследования.
С целью изучения феномена бактериолактии нами на протяжении ряда лет (с 2002 по 2007 гг. включительно) производилось бактериологическое исследование молока лактирующих женщин. Диагноз «Бактериолактия» устанавливали в случае обнаружения в 1,0 мл молока 250 и более КОЕ микроорганизмов.
При исследовании микрофлоры грудного молока 526 женщин микроорганизмы были выделены у 199 человек, что составило 37,8%.
Качественный состав высеянных культур представлен на рис.1.
Рис. 1. Качественный состав бактерий –
контаминантов грудного молока
Из его данных следует, что наиболее часто в молоке обнаруживались грам (+) кокки (75,5%), реже грамнегативные бактерии (9,5%), грибы (10,1%) и бациллы (4,9%).
Таким образом, бактериолактия является довольно частым феноменом. Нами проведена оценка риска развития данного состояния с учетом возраста кормящих женщин, их анамнеза, наличия сопутствующей патологии.
По возрастному составу все наблюдаемые женщины были подразделены на 5 групп: до 20 лет, от 21 до 25, от 26 до 30, 31-35 и старше 35 лет. Данное распределение представлено в табл.1.
Из представленных данных видно, что независимо от характера бактериолактии максимальное число женщин принадлежало к возрастной группе 21 – 25 лет. Далее следовали женщины в возрасте 26 – 30 лет, затем частота феномена резко снижалась, и минимальные показатели регистрировались у лиц старше 35 лет.
Таблица 1
Распределение лиц обследуемой группы в зависимости от возраста
Возраст
в годах
Грамположительная бактериолактия (N=180)
Грамотрицательная
бактериолактия (N=19)
абс.
%
абс.
%
До 20
24
13,3
2
10,5
21 – 25
84
46,6
7
36,8
26 – 30
59
32,8
5
26,3
31 – 35
10
5,6
4
21,1
Старше 35
3
1,7
1
5,3
Изучение частоты бактериолактии в зависимости от порядкового номера родов показало, что данное состояние возникает преимущественно у первородящих женщин (рис. 2). В каждые последующие роды частота бактериолактии снижается.
При изучении анамнеза наличие соматических заболеваний различных систем и органов было установлено у всех (100%) обследуемых (табл. 2).
Таблица 2
Преморбидный фон женщин, страдающих бактериолактией
Сопутствующие заболевания
Абс.
%
Заболевания молочных желез
63
31,7
Гинекологические заболевания
27
13,5
Болезни мочевой системы
31
15,6
Заболевания желудочно-кишечного тракта
26
13,1
Болезни печени и желчевыводящей системы
28
14,0
Сочетание 2-х и более хронических заболеваний
24
12,1
Всего
199
100,0
Из представленных в табл. 2 данных следует, что наиболее значимым в развитии бактериолактии являются болезни молочных желез, таких как лактационный мастит (66,7%), лактостаз (22,2%), мастопатия (6,3%), трещины сосков (4,8%).
Таким образом, изучив факторы, определяющие развитие бактериолактии, можно говорить об условном «портрете» женщины, с высоким риском развития страдания: чаще всего это первородящие молодые женщины в возрасте от 21 до 25 лет, с клиническими признаками лактостаза или имеющими мастит в анамнезе, с хронической патологией желудочно-кишечного тракта, почечными или гинекологическими заболеваниями.
Анализ микрофлоры ротовой полости проведен у 80 детей первого года жизни, получающих грудное вскармливании контаминированным молоком. Учитывая отсутствие у данной группы наблюдаемых зубных рядов, объектом исследования выбрана слюнная жидкость, как наиболее заселяемая микроорганизмами. Исследование проводили в динамике - в 1, 3 и 6 месяцев жизни. Группу сравнения составили 40 младенцев, получающих полноценное грудное вскармливание.
При исследовании микробиоценоза ротовой полости детей в возрасте 1 месяца установлено наличие факультативно-анаэробных молочнокислых бактерий, значительное число аэробных микроорганизмов (стрептококков, стафилококков), реже определялись грамнегативные бактерии и грибы. Частота выделения анаэробных видов – фузобактерий, бактероидов, вейлонелл была очень низкой (не более 5%).
Из полученных данных видно, что слизистые оболочки у всех младенцев были колонизированы лакто- и бифидобактриями, при этом их количество варьировало в узких пределах – от 102 до 103 КОЕ/см2. Распространенность S. salivarius составила 90%, S. sanguis – 40,0%, S. mitis 65,0%, что не имело достоверных различий с группой сравнения. Та, эпидермальные стафилококки высевались со слизистых оболочек в 95% наблюдений, при этом их количество достоверно превышало показатели группы сравнения (8,65?103±0,44?102 КОЕ/ ед.суб.).
Слизистые оболочки у 65 (81,2%) детей были колонизированы S. aureus, тогда как в группе сравнения - 57,5%. При этом плотность обсеменения золотистыми стафилококками увеличивалась более чем в 100 раз, составляя 1,74?104±1,32?102 КОЕ/ ед.суб..
Установлена высокая частота выделения клебсиелл (21,2%), со средней плотностью колонизации 1,01?104±4,90?102 КОЕ/ ед.суб., что достоверно превышало аналогичные показатели группы сравнения.
В 17,5% (14) наблюдений на слизистой оболочке ротовой полости детей обнаруживались эшерихии, при этом количество данных микроорганизмов варьировало от 100 до 1000 КОЕ в единице субстрата, составляя в среднем 3,80?102±36,97. Грибы рода Candida высевали у 30% (24) обследуемых, при этом их количество также было весьма значительным - 6,99?103±1,27?102 КОЕ/ ед.суб..
Таким образом, микрофлора детей 1-го месяца жизни, получавших контаминированное грудное молоко, характеризовалась высокой плотностью обсеменения условно-патогенными бактериями, достоверно превышающими показатели контрольной группы.
Изучение микрофлоры ротовой полости в 3 месяца показало отсутствие существенных изменений в микробиоценозе.
Так S. aureus выделяли в 83,7% (67) наблюдений, однако плотность его колонизации в этот период достоверно снижалась, составляя в среднем 5,13?103±1,24?102 КОЕ/ ед.суб. (p<0,05). Уменьшилось число детей, колонизированных Kl.pneumonia (18,7%). Так если в 1 месяц клебсиеллы обнаруживали у всех новорожденных, получавших контаминированное ими грудное молоко, то в возрасте 3 месяца у 2 из них данные бактерии выделены не были.
Число детей, обсемененных грибами, сократилось до 26,2%, тогда как эшерихии стали выделять чаще (20,0%).
Что касается S. epidermidis, то частота его обнаружения составила 92,5% (74).
При анализе микробного пейзажа слизистых оболочек детей в возрасте 6 месяцев было установлено значительное улучшение микроэкологических показателей.
Из представленного ниже рис.3 видно, что основной аэробный симбионт микробиоценоза - S. epidermidis к этому сроку обнаруживался у 100% детей. Кроме того, отмечено снижение частоты выделения S. aureus (до 67,5%), грибов рода Candida (до 6,2%) и эшерихий (с 27,5% до 21,2%). Однако процент выделения клебсиелл оставался на прежнем уровне – 21,2%, колонизируя 100% детей, получающих контаминированное ими грудное молоко.
Количественная динамика условно-патогенных бактерий, колонизирующих слизистые оболочки детей в различные возрастные периоды, представлена в табл. 3.
Рис. 3. Динамика выделения условно-патогенных микроорганизмов со слизистых оболочек полости рта детей, вскармливаемых контаминированным грудным молоком, (%).
Таблица 3
Динамика плотности колонизации УПМ слизистых оболочек детей, получающих контаминированное грудное молоко
Микроорганизм
Плотность колонизации, M±m, КОЕ/ ед.суб.
Возраст
1 месяц
3 месяца
6 месяцев
S. epidermidis
8,65?103±0,44?102
8,76?103±4,26?102
4,43?103±6,50?102**
S. aureus
1,74?104±1,32?102
5,13?103±1,24?102*
3,76?103±7,45?102**
Kl. pneumonia
1,01?104±4,90?102
4,48?103±8,03?102*
3,01?103±2,50?102
E. coli
3,80?102±36,97
4,24?102±54,36
4,81?102±76,20
Candida spp.
6,99?103±1,27?102
1,92?1034,20?102*
2,62?103±2,00?102
Примечание: *- достоверность различий (1мес. – 3 месяца), **- (3 – 6 месяцев)
При анализе данных таблицы установлено, что в процессе роста ребенка плотность колонизации S. aureus достоверно снижалась в течение всего периода наблюдения (с 1,74?104±1,32?102 в первом месяце до 5,13?103±1,24?102 и 3,76?103±7,45?102 КОЕ/ ед.суб. в 3-м и 6-ом), количество S. epidermidis снижалось после 3 месяца жизни (с 8,76?103±4,26?102 до 4,43?103±6,50?102 КОЕ/ ед.суб.).
Значимое уменьшение обсемененности слизистых оболочек грибами и клебсиеллами происходило к 3 месяцу жизни (с 6,99?103±1,27?102 до 1,92?103±4,20?102 КОЕ/ ед.суб. и от 1,01?104±4,90?102 до 4,48?103±8,03?102 КОЕ/ ед.суб. соответственно), а затем их количество оставалось на прежнем уровне.
Проведенный статистический анализ показал наличие высокой корреляции между качественным составом грудного молока и биоценозом слизистой оболочки ротовой полости. Так, у всех новорожденных (100%), получающих молоко, обсемененное клебсиеллами, данные бактерии обнаруживались в ротовой полости в высокой (103-105) концентрации (r=0,67). Аналогичная закономерность была установлена для S. epidermidis и S. aureus (r=0,76 и r =0,62).
Представленные результаты показывают, что происходящие изменения проявляются, прежде всего, в увеличении значимости условно-патогенной флоры, при этом характер колонизации в значительной степени определяется бактериями-контаминантами.
Литература.
1. Анохин В.А. Материнская бактериолактия и дисбактериоз кишечника у детей // Материалы 3 Всероссийского конгресса педиатров-инфекционистов России «Актуальные вопросы инфекционной патологии у детей». - Москва, 2004. - С.26-26.
2. Зинкевиич О.Д., Саматов В.А. Этиопатогенетическое значение грамположительный и грамотрицательный бактериолактии в развитии бактериальных инфекций в первые годы жизни// Детские инфекции.- 2005.- Т.4.№4.-С.35-38.
3. Хасанова Е.Е. Дисбактериоз кишечника у младенцев, получающих грудное молоко, обсемененное кишечной палочкой // Материалы 12 конгресса детских гастроэнтерологов России «Актуальные пролблемы абдоинальной патологии у детей».- Москва. 2005.-С.326.